冷凍真空干燥活疫苗簡稱凍干疫苗，是指將活疫苗按適當(dāng)比例，與含有大量水分的穩(wěn)定劑混合成為懸浮液，分裝后放入冷凍真空干燥機(jī)中，經(jīng)預(yù)先凍結(jié)，在低溫和真空條件下使水分升華，干燥成疏松多孔狀、體積不變的干燥制品。由于冷凍干燥是在低溫真空狀態(tài)下完成的，可以保護(hù)蛋白質(zhì)不變性，減少氧化環(huán)節(jié)，使微生物和某些酶活性不受影響。同時(shí)凍干疫苗在真空狀態(tài)下封口保存，具有保存時(shí)間長，使用時(shí)加稀釋液能迅速溶解，復(fù)原性狀不變等優(yōu)點(diǎn)。是目前活疫苗z*常用的保存方法。

凍干疫苗真空度的檢測z*直觀、簡便的方法是用市售的高頻火花真空測定器。它能在容器外邊測量容器內(nèi)部的真空度，適用于采用真空密封、并用玻璃容器盛裝的凍干疫苗。其原理是利用忒斯拉線圈的高頻交變電場，電子倒轉(zhuǎn)使氣體分子電離而產(chǎn)生所謂無極放電現(xiàn)象，根據(jù)稀薄氣體空氣 的放電顏色能粗略地估計(jì)出容器內(nèi)真空度的高低。在通電狀態(tài)下，把線圈的尖端靠近疫苗玻璃瓶， 觀察瓶內(nèi)的放電狀態(tài)。常壓下即完全失真空，不產(chǎn)生放電現(xiàn)象。隨著真空度的提高，瓶內(nèi)呈現(xiàn)出從桃紅到藍(lán)白的放電，在具有換氣裝置的暗室內(nèi)進(jìn)行操作就容易判斷放電的顏色，放電顏色因玻璃瓶內(nèi)氣體的種類而異。若是空玻璃瓶且瓶內(nèi)氣體是空氣，根據(jù)殘留空氣分子的多少，其放電狀態(tài)依序如下：

1、當(dāng)瓶內(nèi)完全失真空，為常壓狀態(tài)、即1 個(gè)大氣壓（760mmHg） 時(shí)不產(chǎn)生放電現(xiàn)象。

2、氣體壓力為10mmHg 時(shí)，輝光放電變成淡桃紅， 出現(xiàn)光的條紋。隨著真空度的增高，光的條紋的間隔也逐漸拉大，這以下的放電叫做真空放電。

3、真空度在100μmHg時(shí)，暗區(qū)約為 10mm，整個(gè)管子瓶顯示淡桃紅色的放電。

4、真空度更高，達(dá)到 50μmHg時(shí)，管壁發(fā)出熒光，中心部出現(xiàn)淡紅色的芯，熒光的顏色因瓶子玻璃種類而異， z*普通的鈉玻璃瓶內(nèi)真空放電呈綠色，鉛玻璃或硼硅硬質(zhì)玻璃瓶呈淡紫色。

5、真空度為10μmHg 或更小數(shù)值時(shí)，芯也消失，整個(gè)管發(fā)出熒光，熒光強(qiáng)度與真空度和電壓有關(guān)。如為普通感應(yīng)線圈，整個(gè)管發(fā)出強(qiáng)烈的藍(lán)白色熒光。

6、當(dāng)真空度達(dá)到1μmHg 或更小數(shù)值時(shí)，熒光幾乎消失。這種現(xiàn)象在凍干疫苗中一般不會(huì)出現(xiàn)， 因?yàn)檫@不僅要增加設(shè)備的投資，而且真空度太高對凍干并沒有好處，1 克水在100μmHg 時(shí)，將產(chǎn)生 9500升的水蒸汽，壓力再降低時(shí)產(chǎn)生的蒸汽體積將更大； 另外真空度太高時(shí)，凍干箱內(nèi)的熱傳遞不能以對流的方式，只能依靠傳導(dǎo)和輻射，由于玻璃容器和冰是熱的不良導(dǎo)體，而輻射作用在低溫下又很微弱，對凍干速度不利。所以一般凍干結(jié)束時(shí)的真空度控制在 5~30μmHg。

由此可見

真空放電輝光的顏色越淺真空度越好。凍干疫苗采用真空狀態(tài)下凍干箱內(nèi)直接加塞的，瓶內(nèi)不僅殘留極少量稀薄空氣分子，還由于不同疫苗的抗原成份與凍干穩(wěn)定劑成份各不相同，瓶內(nèi)粉狀顆粒數(shù)量與殘余水分也存在差異，其真空度的變化較空瓶要復(fù)雜得多。因此，《 獸用生物制品規(guī)程》 規(guī)定，對于采用真空密封，并用玻璃容器盛裝的凍干制品，使用高頻火花真空測定器進(jìn)行密封后容器內(nèi)真空度的測定，如果容器內(nèi)出現(xiàn)白色、粉色和紫色輝光的均屬真空度合格。

檢測時(shí)需要注意的是，放電火花探頭端要離開玻璃外壁1cm左右，間歇放電。不能長時(shí)間停在一處放電，也不能與瓶子封口處金屬鋁蓋接觸，以免擊穿玻璃造成失真空；亦不應(yīng)指向容器內(nèi)的制品部分放電，以免損傷產(chǎn)品。另外剛從冷凍室取出的疫苗應(yīng)在4℃或 室溫放置片刻再測，也可振搖幾次然后再測，這樣可以激活瓶內(nèi)極少量的空氣分子，更準(zhǔn)確地判斷疫苗的真空狀況。